1. 內鏡檢查
胃鏡或纖維食道鏡是診斷食道癌的金標準。通過內鏡可直觀觀察食道黏膜病變，明確腫瘤位置、大小及形態，必要時進行活檢取樣，確定病理類型。
2. 病理活檢
內鏡下取出的組織樣本通過顯微鏡檢查，是確診食道癌的最終依據。病理報告能詳細說明癌細胞類型及分化程度，爲治療提供重要參考。
3. 影像學檢查
CT掃描和MRI有助於評估腫瘤浸潤深度和周圍組織受累情況。PET-CT能夠發現遠處轉移竈，全面評估腫瘤擴散，指導分期和治療方案選擇。
4. 超聲內鏡
結合內鏡與超聲技術，可準確判斷腫瘤浸潤深度及鄰近淋巴結狀況，提升診斷準確性。
5. 血液標誌物
雖然血液腫瘤標誌物如CEA、SCC抗原不能單獨用於診斷，但在輔助判斷疾病進展和療效評估方面具有一定價值。
6. 分子診斷
近年來，基因檢測和分子標誌物的應用爲精準治療提供依據，有助於制定個體化治療方案，尤其在免疫重建細胞治療的選擇和調整中發揮作用。